Criblage d'enzymes d'intérêt biotechnologique à partir des bactéries extrêmophiles isolées de la grande sebkha d’Oran.

Abstract

Les enzymes produites par les microorganismes halophiles et halotolérants offrent de nombreuses possibilités d’applications innovantes dans des domaines variés. Compte tenu de leur importance biotechnologique et du besoin actuel de producteurs plus efficaces de tels catalyseurs, la présente étude visait à cribler des enzymes hydrolytiques : amylases, protéases, estérases et lipases de dix souches isolées de la Grande sebkha d’Oran. La production des enzymes a été évaluée sur milieu gélosé à une concentration de 15% de NaCl. Sur les dix isolats, 9 isolats ont montré des activités hydrolytiques significatives contre au moins de 4 substrats avec une dominance des activités protéasique et cellulosique. Deux isolats, le LMB3S04 et LMB3S25, ont été sélectionnés pour leur large spectre d’activité hydrolytique et leurs niveaux LEA élevés pour la mise en évidence de leurs activités enzymatiques extracellulaires sur milieu liquide. Cette étude a révélé une activité protéasique importante pour l’isolat LMB3S25. L’étude de sa stabilité thermique réalisée à 55°C, 70°C et 100°C pendant 10 minutes a montré une thermoactivation à 55°C, une diminution de l’activité à 70°C et une désactivation complète à 100°C. Les isolats sélectionnés ont également été soumis à une caractérisation phénotypique. Ils se présentent sous forme de bâtonnets à Gram positif, mobiles, et possédant une catalase et oxydase. Le système ID 32 a révélé un potentiel métabolique intéressant et un bagage enzymatique prometteur. L'étude de la tolérance au NaCl a permis de classer l’isolat LMB3S04 parmi les bactéries modérément halotolérantes et l’isolat LMB3S25 parmi les bactéries halophiles extrêmes. La croissance à différentes températures et pH a mis en évidence les caractères thermotolérants et alcalitolérants des isolats. L’antibiogramme a révélé des profils de résistances variés, les isolats ont montré une résistance à la Vancomycine et la Fosfomycine, et une sensibilité à la Kanamycine. Concernant l’amoxicilline, l’isolat LMB3S25 s’est avéré sensible, tandis que l'isolat LMB3S04 a montré une résistance. En ce qui concerne la Tobramycine, l'isolat LMB3S25 a montré une résistance, contrairement à l'isolat LMB3S04 qui y est sensible. Ces isolats ainsi que leurs enzymes peuvent constituer des candidats prometteurs pour diverses applications biotechnologiques.