D’une enzyme à un complément : production/purification et inhibition de l’α-amylase par Schinus molle

Abstract

L’α-amylase est une enzyme hydrolytique impliquée dans la dégradation de l’amidon en sucres simples. Elle suscite un intérêt scientifique important en raison de ses nombreuses applications dans les domaines agroalimentaire, biotechnologique et pharmaceutique. Dans cette étude, l’α-amylase a été produite à partir d’Aspergillus niger cultivé en milieu liquide (Potato Dextrose Broth), puis purifiée par précipitation au sulfate d’ammonium, et ses paramètres cinétiques ont été déterminés et comparés à ceux d’une α-amylase commerciale. Par ailleurs, des extraits aqueux des fruits mûrs et immatures de Schinus molle ont été préparés par décoction et macération, suivis d’une caractérisation phytochimique qualitative et quantitative, ainsi qu’ une évaluation de leur activité inhibitrice sur l’α-amylase et de leur effet hémolytique. Les résultats ont montré que l’enzyme extraite présente une activité spécifique remarquable (4464,46 U/mg), avec un Km de 0,0393 mmol/L et une Vmax de 0,20704 mmol/min, indiquant une forte affinité pour le substrat et une efficacité catalytique importante. Les analyses phytochimiques ont révélé la richesse des extraits en flavonoïdes, tanins, alcaloïdes et coumarines, avec des teneurs élevées notamment dans l’extrait brut préparé macération des fruits immatures (88,9 ± 0,04 µg EAG/mg ES pour les flavonoïdes et 240,3 ± 0,007 µg EC/mg ES pour les tanins), tandis que l’extrait obtenu par décoction des fruits mûrs a présenté la meilleure activité inhibitrice avec une CI50 de l’ordre de 0,58 mg/mL. Les tests d’hémolyse ont montré un faible effet hémolytique, suggérant une faible toxicité des extraits. En complément, le docking moléculaire a mis en évidence que la quercétine possède la meilleure affinité de liaison avec le site actif de l’α-amylase, confirmant son potentiel inhibiteur. Cette étude met en évidence le potentiel biotechnologique de l’α-amylase produite par Aspergillus niger ainsi que l’intérêt des fruits de Schinus molle comme source naturelle de composés bioactifs inhibiteurs de l’α-amylase.