Etude phytochimique et biologique d'extraits de deux plantes médicinales Genista sahara et Glycyrrhiza glabra

Abstract

ملخص : يركز هذا العمل على دراسة المكونات الكيمونباتية و األنشطة البيولوجية للمستخلصات المستخرجة من نبتتين طبيتين (.Durr. & Cos (saharae Genista. L glabra Glycyrrhiza و اللتان تنتميان إلى عائلة البقوليات والمعروفتان بامتالكهما لخصائص عالجية متعددة. التركيبة الكيميائية لمستخلصات الجزء العلوي لنبتة saharae. G و جذور نبتة glabra. G تمت معاينتهما باستعمال الفصل الكروماتوغرافي عالي اإلستبانة مع وسم البنية الكيميائية بأسلوب التصوير بالرنين المغناطيسي. لدراسة النشاط المضاد لألكسدة استخدمت طرق األكسدة اإلرجاعية بانتقال ذرة الهيدروجين أو/و اإللكترون المفرد. كما تطرقنا لتقييم النشاط المضاد للميكروبات حسب النحو الموصى به من قبل معهد المعاير العيادية و المخبرية . وتم اختبار انحالل الكريات ال دموية الحمراء بقياس نسبة تسرب الهيموغلوبين. في حين ق در النشاط المثبط إلنزيم كولين اإلستيراز باستعمال إنزيمي األستيل كولين إستيراز AChE و البيتيريل كولين إستيراز BChE. معاينة الكروماتوغرافيا السائلة العالية الكفاءة (HPLC (أثبتت عن وجود أحماض الفينول، حمض الهيدروسيناميك و الفالفونوييدات من فئة الفالفونول، إيزوفالفان والفالفونون. كما أوضحت صور طيف الرنين المغناطيسي عن بنية الجنيستيين المستخلصة من نبتة saharae. G و الجالبريدين من نبتة glabra. G .فيما يخص قدرة مستخلص الكلوروفورم و إثيل األستات للنبتتين كمضادات األكسدة تبين أنها ذات أهمية مع تراكيز مثبطة بنسبة 05 %تساوي 54.3 .مل/مكغ 8.0. ± 8..12 و A0,5CUPRAC= 35.63 ± 1.42 ومع مل/مكغ 5.00 ± 4.3 و IC50ABTS = 5..0 ± وأوضحت الدراسة أن مستخلص الكلوروفورم للنبتتين أثبت نجاعته اتجاه البكتيريا بتركيز أدنى مثبط يساوي MIC= 0.0 .مكغ/مل. عالوة على ذلك أظهر مستخلص الكلوروفورم لجذور glabra. G نشاطا مثبطا قويا ألنزيم البيتيريل كولين إستيراز بتركيز مثبط يساوي IC50Bch =18.3 ± 18.5 مكغ/مل .أ ما بالنسبة الختبار انحالل ال دم عن طريق قياس نسبة تس رب الهيموغلوبين تبين أ ن المستخلصات المدروسة ال تملك أ ي تأثير سام ملحوظ على الكريات ال دموية الحمراء. الكلمات المفتاحية: البقوليات، الفصل الكروماتوغرافي عالي اإلستبانة، التصوير بالرنين المغناطيسي، النشاط المضاد لألكسدة، التركيز األدنى المثبط، البيتيريل كولين إستيراز. Résumé Ce travail porte sur l’étude des constituants phytochimiques et les activités biologiques invitro des extraits de ces deux plantes Genista saharae (Cos. & Durr.) et Glycyrrhiza glabra L. appartenant à la famille des Fabacées. La composition chimique des extraits de la partie aérienne de la plante G. saharae et les racines de G. glabra a été analysée via une chromatographie liquide à haute performance RP-HPLC-PDA et une caractérisation par RMN 1H et 13C. L’activité antioxydante a été évaluée par des méthodes basées sur le transfert d’atome d’hydrogène et le transfert d’électron singulier. L’activité antimicrobienne des extraits a été testée vis-à-vis de différentes souches en utilisant la méthode de diffusion des disques et la détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI). En outre, le test d’hémolyse a été réalisé par le suivi de la fuit d’hémoglobine. Tandis que, l’activité inhibitrice du cholinestérase a été estimée par deux enzymes l’acétylcholinestérase AChE et la butyrylcholinestérase BChE. L’analyse chromatographique a mis en évidence la présence des acides phénoliques, des acides hydroxycinnamiques et des flavonoïdes (les flavonols, les isoflavanes et les flavanones). Ce pendant, la caractérisation par RMN nous a permis d’élucider la structure de la génistéine à partir de la plante G. saharae et la glabridine de l’espèce G. glabra. Le potentiel antioxydant des extraits chloroformiques et acétates d’éthyles des deux plantes s’est révélé intéressant avec des CI50ABTS= 4,03 ± 0,15 et 3,45 ± 0,99 µg/mL respectivement et avec une A0,5CUPRAC= 35,63 ± 1,42 et 21,78 ± 2,91 µg/mL. Les extraits chloroformiques des deux plantes ont montré un pouvoir antibactérien important avec une CMI de l’ordre de 19,5 µg/mL. En plus, l’extrait chloroformique de G. glabra a manifesté une puissante activité inhibitrice de BChE avec une IC50 de 4,72 ± 0,72 µg/mL, une valeur supérieure comparée à celle du standard galantamine. Enfin les tests d’hémolyse des extraits des deux pantes n’ont pas montré d’effet toxique vis-à-vis des globules rouges humains. Mots clés: Genista saharae (Cos. & Durr.), Glycyrrhiza glabra L., RP-HPLC-PDA, RMN, ABTS, CUPRAC, CMI, BChE. Abstract: This work is based on the study of phytoconstituents and in-vitro biological activities of two plants Genista saharae (Cos. & Durr.) and Glycyrrhiza glabra L. which belonging to the Fabaceae family. The chemical compositions of aerial part of G. saharae and G. glabra roots extracts were analyzed by the high performance liquid chromatography and characterized with 1H and 13C NMR. The antioxidant activities were evaluated using hydrogen atoms and single electron transfer. The antimicrobial activity of the extracts was realized against different strains using the Minimal Inhibitory Concentration (MIC). The hemolysis test was performed by following the hemoglobin leakage. When, the cholinesterase inhibitory activity was performed through the acetylcholinesterase and butyrylcholinestrase enzymes. The chemical analysis revealed the presence of phenolic acids, hydroxycinnamic acid and flavonoids illustrated by the presence of flavonol, isoflavane and flavanones. However, the NMR spectroscopy allowed the characterization of genistein from G. saharae plant and glabridin structure from G. glabra plant. The antioxidant assays revealed that chloroformic and ethyl acetate extracts are the best among the others extracts with a IC50ABTS= 4.03 ± 0.15 and 3.45 ± 0.99 µg/mL, respectively and with an A0,5CUPRAC= 35.63 ± 1.42 and 21.78 ± 2.91 µg/mL. The chloroformic extracts of both Fabaceae presented the effective antibacterial activity with MIC’s = 19.5 µg/mL against the most tested bacteria. Moreover, the same extract showed a potent butyrylcholinestrase inhibitory activity with IC50BChE= 4.72 ± 0.72 µg/mL, which is too strong then the standard drug. When, the hemolysis tests of two plant extracts showed that the extracts didn’t have a toxic effect against human blood cells. Keywords: Genista saharae (Cos. & Durr.), Glycyrrhiza glabra L., RP-HPLC-PDA, NMR, ABTS, CUPRAC, MIC, BChE.