Contribution à l’étude de l’effet antidiabétique des extraits de graines de Citrullus colocynthis Chez le rat Wistar rendu diabétique par la streptozotocine

Abstract

L’ethnopharmacologie, une discipline qui se partage entre la tradipratition et l’expérimentation aux laboratoires, a pour but d’argumenter scientifiquement les effets thérapeutiques des plantes médicinales utilisées en médecine traditionnelle. Parmi ces plantes Citrullus colocynthis ou coloquinte, plante de la famille des cucurbitacées, anciennement utilisée par la population de diabétiques, sous forme d’infusion des graines ou du fruit entier pour traiter le diabéte sucré. De ce fait, l’objectif de cette étude est consacré à l’évaluation des propriétés antidiabétiques des extraits de graines de cette plante in vivo chez des rats rendus diabétiques par la STZ et in vitro sur des îlots pancréatiques isolés de rat. Différents extraits aqueux et organiques ont été préparés à partir des graines de Citrullus colocynthis: extrait brut aqueux non dégraissé (EI) et dégraissé (EII), extrait hydrométhanolique (EM), acétate d’éthyle (EAc) et n-butanol (En-B). L’analyse phytochimique a révélé la présence de tanins, flavonoïdes et de terpénoïdes principalement. Selon le type d’extrait ou le solvant utilisé, les extraits EAc et EM sont caractérisés par des teneurs relativement élevés en polyphénols et en flavonoïdes, dont les taux sont de 298,88; 238,8mg eq AG/g et 219,1; 147,76mg eq Cat/g respectivement. Ces flavonoïdes identifiés par CCM comme étant la quercétine et la mérycétine. Leur effet antioxydant comme effet antiradicalaire sur le DPPH, donne les résultats suivant IC50 EAc=350μg/ml et IC50 EM=580μg/ml. Chez les rats diabétiques, les extraits EI, EII et En-B montrent un effet antihyperglycémiant significatif à court terme (3h), et un effet antidiabétique à long terme (3 semaines). Tandis que l’effet antidiabétique des extraits EM et EAc n’apparait qu’à partir du 14ème jour. Cet effet à long terme est accompagné de la correction de certains paramètres métaboliques (cholestérolémie totale, triglycéridémie, urée, créatinine et transaminases), tissulaires (régénération des cellules -pancréatiques) et autres syndromes diabétiques (polyphagie, polydipsie et chute de poids corporel) altérations provoquées par l’installation du diabète induit par la STZ. Par ailleurs, le traitement préalable des rats par l’extrait EI montre un effet protecteur de ce dernier vis-à-vis des effets toxiques de la STZ. Les extraits testés ne présentent aucun signe de toxicité apparente chez les rats traités. L’étude in vitro de l’activité antidiabétique des extraits de graines de la coloquinte a montré, un effet insulinotrope dose dépendant des extraits EM et EAc, et un effet inhibiteur de la sécrétion de l’insuline dose dépendant des extraits EI et En-B. L’extrait EM s’est révélé aussi une cytoprotection des îlots pancréatiques vis-à-vis de la toxicité de la STZ. En conclusion, ces résultats préliminaires nous ont permis de mettre en évidence l’effet antidiabétique et insulinotrope des extraits bruts non toxiques de la coloquinte, qui méritent des études chimiques et biologiques approfondies afin de confirmer l’utilisation pharmaceutique de la coloquinteعلم الصيدلة النباتية هو منهج ينقسم بين الممارسة التقليدية والمختبرات التجريبية، هدف هذه الدراسات هو إثبات الآثار العلمية للنباتات الطبية المستخدمة منذ القدم في الطب التقليدي. من بين هذه النباتات الحنظل أو نبتة الحنظل تستخدم من قبل مرضى السكري، على شكل مطبوخ الفواكه أو البذور الجافة. ولهذا تهدف هذه الأطروحة إلى تقييم خصائص مستخلصات بذور الحنظل المضادة للسكري في الجسم الحي عند الجرذان المصابة بداء السكري بواسطة حقن سترابتوزوتوسين STZ streptozotocine وكذلك على جزر البنكرياس المعزولة من الفئران. تم تحضير مختلف المستخلصات المائية والعضوية المستحضرة من بذور نبات الحنظل: المستخلص المائي الخام بدون دهون ( EI ( و المستخلص المائي الخام بالدهن ) IEI (، المستخلص المائي-اللكحولي ) ME ) hydromethanolic ، مستخلص خلات الإبثيل ) EAC ( و مستخلص البوتانول ) B - n (.الكشف التحليل الكيميائي النباتي الاولي اثبت وجود العفص، الفلافونيدات، التيربينويدات، مع غياب المواد القلوية. و هذا وفقا لنوع المستخلص و المذيبات المستخدمة. تتميز المستخلصات EAC و EM 8.2.2 ملغ مكافئ/ ، بمستويات عالية نسبيا من مادة البوليفينول والفولافونويدات، 8.2.2 AG 274.41 ملغ ،82.. و 2 مكافئ/ِ Cat . هذه المستخلصات تتميز كذلك بقوة الكسح الراديكالية المضادة للأكسدة على DPPH وأعطت النتائج التالية 350μg/ml = IC50 EAC و μg/m1 =025 IC50 EM . اثبتت نتائج الكروماتوغرافيا على الطبقة الرقيقة وجود merycitin و quercetin في هذه المستخلصات. عند الجرذان المصابة بداء السكري، اظهرت المستخلصات EI ، EII و B - n خفض مستوى السكر في الدم على المدى القصير )سا 3 ( في حين أن تأثير EM و EAC يظهر على المدى الطويل ). أسابيع( ابتداء من اليوم 27 . يتوافق مفعول هذه المستخلصات في خفض مستوى السكر في الدم مع تصحيح بعض المكونات الأيضية )الكولسترول الكلى، الدهون الثلاثية، اليوريا، وبعض الانزيمات الكبديه( و نسيجيه كتجديد خلايا β البنكرياسيه وكذلك بعض اعراض السكري النهام، العطش ( (polyphagie, polydipsie وانخفاض وزن الجسم التي يحدثها مرض السكري الناجم عن STZ . بالإضافة إلى ذلك فإن المعالجة المسبقة للفئران بمستخلص EI يظهر تأثير وقائي هام نحو الآثار السامة لسترابتوزوتوسين STZ . المستخلصات المدروسة لم تظهر أي علامة واضحة السمية على الفئران. في الدراسة المخبرية ) in vitro ( مستخلصات بذور الحنظل اظهرت تأثيرها على تحفيز جزر البنكرياس المعزولة من الفئران على افراز الأنسولين خاصة EM و EAC لهم تأثير كابح بشكل هام. المستخلص المائي-اللكحولي ) ME ( اثبت فعاليته في حماية جزر البنكرياس المعزولة ضد الآثار السامة لسترابتوزوتوسين STZ . سمحت لنا النتائج الأولية بتأكيد فعالية بذور الحنظل في معالجة مرض السكري التي تستحق دراسات بيولوجية كيميائية واسعة بغية تأكيد الاستخدام الصيدلاني لنبتة الحنظل.Ethnopharmacology, a discipline that is divided between traditional practice and experimenting laboratories, is to argue scientifically therapeutic effects of medicinal plants used in traditional medicine. Among these plants Citrullus colocynthis or colocynthis, plant of cucurbitaceae family, was formerly used by diabetic, as an infusion of seeds or whole fruit. Therefore, the aim of this study is concerns the evaluation of anti-diabetic properties of seeds extracts in vivo in STZ diabetic rats and in vitro in isolated pancreatic rat islets. Different organic and aqueous extracts were prepared from the seeds of Citrullus colocynthis: aqueous crude extract-fat (EI) and defatted extract (EII), hydromethanolic extract (EM), ethyl acetate (EAc) and n-butanol (En-B). The phytochemical analysis revealed the presence mainly of tannins, flavonoids and terpenoids. According to the type of extract or the solvent used, EAc and EM extracts are characterized by relatively high levels of polyphenols and flavonoids, 298.8; 238.8 mg eq AG/g and 219.1; 147.76 mg eq Cat/g respectively. Flavonoids such as identified by TLC as merycitin and quercetin. Their antioxidant effect on DPPH radical scavenging effect, gives the following results EAC IC50 = 350μg/ml and IC50 EM=580μg/ml. In diabetic rats, EI, EII and In-B extracts show a significant short-term antihyperglycemic effect (3h) and a long-term antidiabetic effect (3 weeks). While the antihyperglycemic effect of EM and EAc extracts appears only from the 14th day. The long term antihyperglycemic effect is accompanied by correcting some metabolic parameters (total cholesterol, triglycerides, urea, creatinin and transaminases), tissular (regeneration of pancreatic -cells) and other diabetic symptoms (polyphagia, polydipsia and falling body weight) caused by instatllation of diabetes induced by STZ. In addition, the pretreatment of rats with EI extract shows a protective effect towards the toxic effects of STZ. The extracts tested show no signs of apparent toxicity in rats. The antidiabetic activity in vitro study of colocynthis seeds extracts showed a dose-dependent insulinotropic effect of EM and EAc extracts and an inhibitory dose dependent effect on insulin secretion of EI and En-B extract. EM extract has proved also pancreatic cytoprotection towards the toxicity of STZ. In conclusion, these preliminary results allowed us to demonstrate the antidiabetic and insulinotropic effect of non-toxic crude colocynthis extracts, which deserve extensive chemical and biological studies in order to confirm a pharmaceutical use of colocynthis.