Etude phytochimique et évaluation des activités hémolytique, antioxydante et antidiabétique des extraits et fractions enrichies en polyphénols de Salvia officinalis L.

Abstract

Résumé Salvia officinalis de la famille des Lamiacées présente, dans la médecine traditionnelle, un vaste potentiel à traiter diverses affections et une efficacité relative à contrôler le diabète en raison de sa richesse en composés bioactifs. Ce travail porte sur une recherche phytochimique qualitative et des dosages quantitatifs des composés phénoliques des extraits méthanol-eau (70/30) préparés par infusion, décoction ou macération et leurs fractions acétate éthyle et nbutanol. Le test hémolytique in vitro a été utilisé pour mesurer la toxicité des différents extraits et fractions sur les érythrocytes humains pendant 60 min. L’évaluation de leur activité antioxydante a été effectuée in vitro par la méthode de piégeage du radical DPPH, le test de réduction du fer et le test de la capacité antioxydante totale. De plus, nous avons évalué leurs activités inhibitrices in vitro sur l'α-amylase et l'α-glucosidase. Le screening phytochimique a révélé la richesse des extraits et fractions en tanins, terpènoïdes, composés réducteurs, flavonoïdes, quinones, coumarines et saponines. La fraction acétate éthyle préparée par macération a démontré les taux les plus élevées en polyphénols totaux (399,39 ± 0,45 µg EAG/mg ES) et en flavonoïdes (345,84 ± 0,06 µg EC/mg ES). Les résultats de la toxicité ont montré que l'activité hémolytique de tous les extraits et fractions n’a pas dépassé les 20% et qu’elle a été dose-dépendante. Les fractions acétate éthyle préparées par infusion, décoction ou macération ont montré des taux d’hémolyse faibles (1,79% ± 0,03, 11,58% ± 0,1, 3,77 % ± 0,02, respectivement pour la dose de 200 mg/ml). La fraction acétate éthyle préparée par macération a démontré l'activité du piégeage du radical DPPH la plus forte (CI50 = 208,51 ± 15,77 µg/ml), le pouvoir réducteur du fer le plus élevé (EC50 = 250 ± 0,001 µg/ml) et la capacité antioxydante totale la plus puissante (891,33 ± 0,0008 µg EAA/mg E). Ainsi, les extraits et les fractions ont montré un effet inhibiteur significatif sur l'α-amylase et l'αglucosidase. La fraction acétate éthyle préparée par macération a révélé le meilleur pouvoir inhibiteur de l'α-amylase et de l’ 𝛼-glucosidase (CI50 = 38,86 ± 1,58 µg/ml et 27,93 ± 2,81 µg/ml, respectivement). Ces résultats suggèrent que les activités hémolytique, antioxydante et antidiabétique de S. officinalis pourraient contribuer à des effets thérapeutiques bénéfiques sur le diabète et le stress oxydatif. Les fractions acétate éthyle enrichies en polyphénols pourraient être considérées comme une source d'antioxydants naturels et davantage utilisées pour la prévention, le traitement du diabète et ses complications. Mots clés : S. officinalis, composés phénoliques, stress oxydatif, diabète sucré, hémolyse Abstract Salvia officinalis from the Lamiaceae family presents a vast potential to treat various ailments and its effectiveness in controlling diabetes in traditional medicine because of its richness in bioactive compounds. This work relates to qualitative phytochemical research and quantitative assays of phenolic compounds in methanol-water extracts (70/30) prepared by infusion, decoction or maceration and their ethyl acetate and n-butanol fractions. The in vitro hemolytic test was used to measure the toxicity of the different extracts and fractions on human erythrocytes for 60 min. The evaluation of their antioxidant activity was performed in vitro by DPPH radical scavenging method, iron reduction test and total antioxidant capacity test. In addition, we evaluated their inhibitory activities in vitro on α-amylase and αglucosidase enzymes. Phytochemical screening revealed the richness of extracts and fractions in tannins, terpenoids, reducing compounds, flavonoids, quinones, coumarins and saponins. Ethyl acetate fraction prepared by maceration demonstrated the highest levels of total phenolics (399.39 ± 0.45 µg EAG / mg ES) and flavonoids (345.84 ± 0.06 µg EC / mg ES). Toxicity results showed that hemolytic activity of all extracts and fractions did not exceed 20% and it was dose dependent. Ethyl acetate fractions prepared by infusion, decoction or maceration exhibited the lowest hemolysis rates (1.79% ± 0.03, 11.58 % ± 0.1, 3.77 % ± 0.02, respectively for the dose of 200 mg/ml). The fraction of ethyl acetate prepared by maceration demonstrated the strongest DPPH radical scavenging activity (IC50 = 208.51 ± 15.77 µg / ml), the highest reducing power of iron (EC50 = 250 ± 0.001 µg / ml) and the strongest total antioxidant capacity (891.33 ± 0.0008 µg EAA / mg E). Thus, extracts and fractions showed a significant inhibitory effect on α-amylase and α-glucosidase. Ethyl acetate fraction prepared by maceration revealed the best inhibiting effect on α-amylase and 𝛼-glucosidase (IC50 = 38.86 ± 1.58 and 27.93 ± 2.81 µg / ml, respectively). These results suggest that the hemolytic, antioxidant and antidiabetic activities of S. officinalis may contribute to its traditionally claimed therapeutic benefits on diabetes and oxidative stress. Phenolic enriched ethyl acetate fractions could be considered as a source of natural antioxidants and further developed for the prevention and treatment of diabetes and its complications. Key words: S. officinalis, phenolic compounds, oxidative stress, diabetes mellitus, hemolysis الملخص تقذو انًُشايُخ ، يٍ عبئهخ Lamiaceae ، فٍ انطت انتقهُذٌ إيكبَبد هبئهخ نعالج األيشاض انًختهفخ وفعبنُتهب فٍ انسُطشح عهً داء انسكشٌ ثسجت ثشائهب ةانًشكجبد انُشطخ ثُىنىخُب. َتعهق هزا انعًم ثجحىث كًُُبئُخ َجبتُخ َىعُخ وفحىصبد كًُخ نًحتىَبد انًشكجبد انفُُىنُخ نًستخهصبد الكحول المائي )70/30 )انًحعشح عٍ غشَق انتسشَت، انغهٍ أو انُقع ويشتقبد أسُتبد اإلَثُم و n- ثىتبَىل. تى استخذاو اختجبس اَحالل انذو فٍ انًختجش نقُبط سًُخ انًستخهصبد و انًشتقبد انًختهفخ عهً كشَبد انذو انحًشاء انجششَخ نًذح 60 دقُقخ عُذ 37 دسخخ يئىَخ. تى إخشاء تقُُى َشبغهى انًعبد نألكسذح فٍ انًختجش عٍ غشَق غشَقخ DPPH واختجبس اسخبع انحذَذ واختجبس انقذسح انكهُخ نًعبداد األكسذح. ثبإلظبفخ إنً رنك ، قًُب ثتقُُى أَشطتهب انًثجطخ يخجشَب عهً إَضًَبد أنفب أيُالص وأنفب غهىكىصَذاص. كشف انفحص انكًُُبئٍ انُجبتٍ عٍ ثشاء انًستخهصبد و انًشتقبد ثبنتبَُُبد ، انتشثُُىَذاد ، انًشكجبد انًختضنخ ، انفالفىَىَذ ، انكُُىٌ ، انكىيبسٍَ وانصبثىٍَُ. أظهش يشتق أسُتبد اإلَثُم انًحعش ثبنُقع أعهً يستىَبد إخًبنٍ انجىنُفُُىل )39.399 ± 45.0 يُكشوغشاو يكبفئ حًط انغبنُك نكم يهغ يستخهص خبف( وانفالفىَىَذ )84.345 ± 06.0 يُكشوغشاو يكبفئ كبتشٍُ نكم يهغ يستخهص خبف( . أظهشد َتبئح انتأثُشاد انسبيخ عهً كشَبد انذو انحًشاء انجششَخ ندًُع انًستخهصبد و انًشتقبد أٌ َسجخ اَحالل انذو نى تتدبوص 20 ٪و أَهب تعتًذ عهً اندشعخ. أظهشد يشتقبد أسُتبد اإلَثُم انًحعشح ثبنتسشَت أو انغهُبٌ أو انُقع / يغ 200 نهدشعخ سجخُثبنٍ انتىانً عه 0.02 ± 3.77٪ ، 0.1 ± 11.58٪ ، 0.03 ± ٪1.79( انذو حاللَا يعذالدًَ أد يم(. أظهش يشتق أسُتبد اإلَثُم انًحعش ةانُقع أقىي َشبغ يعبد نهدزوس انحشح DPPH) IC50 =51.208± 77.15 يُكشوغشاو / يم( ويشخع نهحذَذ )001.0 ± 250 = EC50 يُكشوغشاو / يم( وأقىي قذسح إخًبنُخ نًعبداد األكسذح ) 33.891 ± 0008.0 يُكشوغشاو يكبفئ حًط األسكىسثُك نكم يهغ يستخهص خبف(. كًب أظهشد يثجطً كجُ ًشا عهً أنفب أيُالص (IC50= 58.1 ± 86.38 يُكشوغشاو / يم( وأنفب انًستخهصبد وانًشتقبد تأثُ ًشا ب غهىكىصَذاص )IC50 =93.27± 81.2 يُكشوغشاو / يم(. تشُش انُتبئح انًحصم عهُهب أٌ َتبئح اَحالل انذو، األَشطخ انًعبدح نألكسذح و انًعبدح نذاء انسكشٌ نهًُشايُخ قذ تسبهى فٍ فىائذهب انعالخُخ انًضعىيخ تقهُذًَب عهً يشض انسكشٌ واإلخهبد انتأكسذٌ. ًَكٍ اعتجبس يشتقبد أسُتبد اإلَثُم انغٍُ ثبنفُُىل يصذ ًسا نًعبداد األكسذح انطجُعُخ انتٍ ًَكٍ تطىَشهب أَ ًعب نهىقبَخ يٍ يشض انسكشٌ ويعبعفبته وعالخه. الكلمات المفتاحية: انًُشايُخ ، يشكجبد انفُُىل ، اإلخهبد انتأكسذٌ ، داء انسكشٌ ، اَحالل انذو