Profil polyphénolique et activité antioxydante de deux plantes médicinales Pistacia lentiscus. L et Gymnocarpos decander. forsk

Abstract

Cette étude s’inscrit dans le cadre de la recherche de nouveaux antioxydants naturels. L’objectif principal de ce travail est l’étude de la phytochimie, l’évaluation du pouvoir antioxydant, et la recherche de quelques molécules actives de deux plantes médicinales : Pistacia lentiscus L (Anacardiacées), et Gymnocarpos decander forsk (Caryophyllacées). Les résultats du criblage phytochimique ont mis en évidence les principaux métabolites secondaires (flavonoïdes, tanins, saponosides et anthocyanes) dans ces deux plantes. Les extraits bruts et les extraits des tanins enregistrent les plus grands rendements. La quantification des composés phénoliques a montré la richesse des feuilles de P. lentiscus en phénols totaux (216. 289 ± 20. 62 mg GAE / g MS), flavonoïdes et tanins. Pour G. decander, les fleurs présentent les meilleures teneurs en phénols totaux (156,097 ± 2.312 mg GAE / g MS), flavonoïdes, tanins et flavonols. Quatre différentes techniques, in vitro, ont été procédées pour l’évaluation de l’activité antioxydante. La partie des feuilles de P. lentiscus, et la partie fleurie de G. decander ont présenté généralement la meilleure capacité antioxydante. L’extrait des tanins des racines de P. lentiscus (CI50 = 0,061 ± 0,001 mg / ml) et celui des fleurs de G. decander (CI50= 0,083 ± 0,004) ont présenté le pouvoir réducteur le plus considérable. Ces deux extraits marquent aussi l’activité la plus considérable à piéger le radical libre DPPH˙avec des valeurs respectives : CI50 de 0,061 ± 0,000 mg / ml et 0,063 ± 0,001 mg / ml. Pour le test de blanchissement du B-carotène, l'activité la plus élevée a été enregistrée dans la fraction acétate d'éthyle des racines de P. lentiscus (0,052± 0,006 mg / ml) et l’extrait des saponosides des feuilles de G. decander (CI50 = 0,082 ± 0,013). Une analyse CLHP a été réalisée sur quelques fractions flavoniques actives des deux plantes étudiées. Cette analyse nous a permis la détection et la quantification de l'acide gallique, l'acide -coumarique, la catéchine, la quercétine, l'acide férulique, l’acide vanillique et la naringénine dans les deux fractions acétate d’éthyle et n-butanol des feuilles de P. lentiscus. Pour G. decander, cette analyse a montré la présence de la quercétine et de la naringénine dans les deux fractions analysées des fleurs, de l'acide -coumarique dans la fraction acétate d'éthyle et la fraction butanolique des fleurs, et de l'acide vanillique dans la fraction acétate d'éthyle des fleurs. La naringénine est le seul composé trouvé dans la fraction acétate d'éthyle des racines de G. decander. Les résultats de l’analyse CLHP-PR des trois (3) sous-fractions obtenues par chromatographie sur colonne de la fraction acétate d’éthyle des fleurs de G. decander, ont révélé pour la première fois dans cette étude, la présence de seize (16) composés phénoliques dans la SF1 (l’acide caféique, l’acide férulique, l’acide -coumarique, la lutéoline, la lutéoline 7-O glucoside, l’isoquercitrine, l’acide rosmarinique, l’hypéroside, l’oleuropéine, la rutine, la kaempférol, la kaempférol 3-O rutinoside, l’isorhamnétine, l’apigénine, la laricitrine et la polydatine), six (6) composés dans la SF7 (L’acide -coumarique, l’acide synapique, l’oleuropéine, la kaempférol 3 O rutinoside, l’apigénine et la polydatine), et trois (3) composés phénoliques dans la SF8 (l’acide synapique, l’apigénine et la polydatine). Mots clés : Pistacia lentiscus; Gymnocarpos decander; Composés phénoliques ; Activité antioxydante ; Chromatographie sur colonne ; CLHP. Abstract This study is a part of the search for new natural antioxidants. The main objective of this work is the study of phytochemistry, the evaluation of antioxidant activity, and identification of some active molecules of two medicinal plants: Pistacia lentiscus (Anacardiaceae), and Gymnocarpos decander (Caryophyllaceae). The results of the phytochemical screening showed the presence of some secondary metabolites (flavonoids, tannins, saponins and anthocyanins) in these plants. Crude extracts and tannins extracts record the best yields. The quantification of the phenolic compounds showed the richness of leaves of P. lentiscus in total phenolic compounds (216. 289 ± 20. 62 mg GAE / g DM), flavonoids and tannins. For G. decander, flowers reveal the highest total phenolic content (156.097 ± 2.312 mg GAE / g MS), flavonoids, tannins and flavonols. Four different techniques, in vitro, were proceeding for evaluating of antioxidant activity. The leaves of P. lentiscus, and the flowers of G. decander presented usually the best antioxidant capacity. The tannins extract from the roots of P. lentiscus (IC50 = 0.061 ± 0.001 mg / ml) and the flowers tannins extract of G. decander (IC50 = 0.083 ± 0.004) had the best activity to reduce iron. Both extracts also marks the most significant activity to scavenge free radical DPPH˙ with respective values: IC50 of 0.061 ± 0.000 mg / ml and 0.063 ± 0.001 mg / ml. For the bleaching test of B-carotene, the highest activity was registered in the ethyl acetate fraction of roots of P. lentiscus (0.052 ± 0.006 mg / ml) and the leaves saponins extract of G. decander (IC50 = 0.082 ± 0.013). HPLC analysis was performed on some active flavonoid fractions of the two plants tested. This analysis allowed the detection of gallic acid, -coumaric acid, catechin, quercetin, ferulic acid, vanillic acid and naringenin in the ethyl acetate and n-butanol fractions of the leaves of P. lentiscus. For G. decander, this analysis showed the presence of quercetin and naringenin in both fractions analyzed of flowers, the - coumaric acid in the ethyl acetate and the butanol fractions of the flowers, and vanillic acid in the ethyl acetate fraction of flowers. naringenin is the only compound found in the ethyl acetate fraction of the roots of G. decander. The results of HPLC-RP analyses of three sub fractions obtained by column chromatography of the flowers ethyl acetate fraction of G. decander revealed, for the first time in this study, the presence of sixteen (16) phenolic compounds in SF1 (caffeic acid, ferulic acid, - coumaric acid, luteolin, luteolin 7-O-glucoside, isoquercitrin, rosmarinic acid, hyperoside, oleuropein, rutin, kaempferol, kaempferol 3 O rutinoside, isorhamnetin, apigenin, laricitrin, and polydatin), six (6) compounds in the SF7 (-coumaric acid, synapic acid, oleuropein, kaempferol 3 O rutinoside, apigenin and polydatin), and three (3) phenolic compounds in the SF8 (synapic acid, apigenin and polydatin). Keywords: Pistacia lentiscus; Gymnocarpos decander; Phenolic compounds; Antioxidant activity; Column chromatography; HPLC. الملخص تدخل هذه الدراسة في إطار البحث عن مضادات أكسدة جديدة من مصادر طبيعية، الهدف الرئيسي هو دراسة الكيمياء النباتية، تقييم الفعالية المضادة للأكسدة والبحث عن الجزيئات النشطة المسؤولة عن ذلك في اثنتين من النباتات الطبية: )Gymnocarpos decander( و )Pistacia lenticus( البطم العدسي أظهرت نتائج الفحص الكيميائي وجود المركبات الثانوية الأساسية في كلتا النبتتين )الفلافونويدات، العفص، الصابونين والانثسيانين(. سجلت أعلى المردودات في مستخلصات الفحص 20.62 ملغ حمض الغاليك/غرام من المادة الجافة( و ± 216.28( G.decander و أزهار P.lentiscus والمستخلصات الميثانولية. أعلى قيم المركبات الفينولية سجلت على مستوى أوراق 2.312 ملغ حمض الغاليك/غ مادة جافة( ± 156.97( القدرة المعتبرة المضادة للأكسدة. مستخلص فحص جذور G.decander وأزهار P.lentiscus أظهرت مستخلصات أوراق .)in vitro( أربعة تقنيات مختلفة اتبعت لتقييم الفعالية المضادة للأكسدة 0.004 ملغ/ملل( ± 0.083 = Cl 0.001 ملغ/ملل( و ) 50 ± 0.061 = Cl أطهر أكبر النتائج في طريقة الحد من الحديد )التركيز المثبط 50 G.decander ومستخلص الزهور P. lentiscus 0.001 ملغ/ملل( على الترتيب .بالنسبة لتقنية ± 0.063 = Cl 0.001 ملغ/ملل( و ) 50 ± أظهر نفس المستخلصين أحسن النتائج ) 0.061 ،DPPH على الترتيب. فيما يخص تثبيط الجذر الحر G.decander ومستخلص الصابونين لأوراق P.lentiscus سجلت أحسن النتائج على مستوى جزء الأسيتات ايثيل لجذور , βcorotene تبييض كاتشين ، كارستين،حمض الفيروليك و ،-coumaric على بعض مستخلصات الفلافونويد الشطة. سمح هذا التحليل بالكشف النوعي و الكمي لحمض الغاليك ،حمض HPLC -أجرينا تحليل .P.lentiscus في كل مستخلصات الأمييتات ايثيل ون بيوتانول لأوراق Naringénine . Naringénine في كلتا المستخلصين، و بالنسبة للجذور فالمركب الوحيد المكتشف هو Naringénine تم اكتشاف الكارستين و ، G.decander بالنسبة لأزهار (Chrommatographie sur colonne) ال مح صل ع ل يها ب ت ق ن ية ال تح ل يل ا ل كرومات وغراف ي G.nderdeca لثلاث فروع لمستخلصات الأميتات ايتيل لأزهار RP-HPLC نتائج (l’acide cafféique, l’acide férulique, l’acide -coumarique, lutéoline 7-O glucoside, l’isoquercitrine, l’acide rosmarinique, l’hypéroside, كشفت عن وجود l’acide و SF في 1 l’oleuropéine, la rutine, la kaempférol, la kaempférol 3-O rutinoside, l’isorhamnétine, l’apigénine, la laricitrine , la polydatine وفقط ثلاث مركبات SF في 7 L’acide - coumarique, l’acide synapique, l’oleuropéine, la kaempférol 3 O rutinoside, l’apigénine ,la polydatine .8SF في (l’acidesynapique,l’apigénine , la polydatine) Chromatographie sur colonne , CLHP , ال مرك بات ال ف ي نول ية ، الفعالية المضادة للأكسدة , Pistacia lentiscus, Gymnocarpos decander الكلمات المفتاحیة: ا