Effet des anthocyanes sur la β thalassémie : Etude in vitro

Abstract

Résumé : Bien que la β thalassémie majeure soit une hémoglobinopathie génétique caractérisée par un défaut de production de la chaîne de la β-globine, le stress oxydant joue un rôle majeur dans sa physiopathologie. Cela soulève la possibilité d'utiliser des antioxydants pour prévenir les altérations oxydatives au cours de cette pathologie. Les anthocyanes semblent jouer un rôle important dans la prévention de nombreuses pathologies humaines grâce à leurs propriétés antioxydantes. La vulnérabilité de deux lignés cellulaires (GR normaux / thalassémiques, et lymphocytes) humains au stress oxydatif induit par le tert-butyl-hydroperoxyde (TBHP) et leur protection par deux séries d'anthocyanes (naturelles et synthétiques) font l’objet de ce travail. Des érythrocytes de sujets normaux et de patient β-thalassémiques et des lymphocytes de sujets normaux et ont été prélevés et traités in vitro avec du TBHP dans des conditions standardisées. Deux protocoles ont été utilisés afin d’apprécier l’effet direct et l’effet protecteur des anthocyanes vis à vis des dommages générés expérimentalement par le TBHP. La viabilité cellulaire, la formation de MDA et les niveaux de GSH ont été mesurés avant et après le traitement avec les anthocyanes. L'activité antiradicalaire DPPH des anthocyanes a également été mesurée. Nos résultats révèlent que la majorité des anthocyanes testées exercent des effets bénéfiques dépendants de la concentration et du type cellulaire utilisés. En effet, les lymphocytes ainsi que les GR (normaux/thalassémiques) ont montré une sensibilité importante face au TBHP. Par ailleurs, il a été noté que ces anomalies ont été corrigées par les anthocyanes testées à des degrés variables et d’une manière dépendante de la concentration (dosedépendante) La supplémentation en anthocyanes peut constituer une approche supplémentaire pour réduire la gravité des troubles dans lesquels les radicaux libres et le stress oxydant sont des facteurs importants Mots clés : anthocyane, in vitro, ß-thalassémie , statut redox, GSH, MDA. Abstract: Although β thalassemia major is a genetic hemoglobinopathy characterized by a defect in the production of the β-globin chain, oxidative stress plays a major role in its pathophysiology. This raises the possibility of using antioxidants to prevent oxidative damage during this pathology. Anthocyanins seem to play an important role in the prevention of many human pathologies due to their antioxidant properties. The vulnerability of two human cell lines (normal/thalassemic RBCs and lymphocytes) to oxidative stress induced by tert-butyl-hydroperoxide (TBHP) and their protection by two series of anthocyanins (natural and synthetic) are the subject of this work. Red blood cells from normal subjects and patient β-thalassemics and lymphocytes from normal subjects were collected and treated in vitro with TBHP under standardised conditions. Two protocols were used in order to assess the direct effect and the protective effect of anthocyanins against the experimentally generated damage of TBHP. Cell viability, MDA formation and GSH levels were measured before and after treatment with anthocyanins. The DPPH antiradical activity of anthocyanins was also measured. Our results show that the majority of the tested anthocyanins exert beneficial effects depending on the concentration and cell type used. Indeed, lymphocytes as well as RBCs (normal/thalassemic) showed a significant sensitivity to TBHP. Furthermore, it was noted that these abnormalities were corrected by tested anthocyanins with Varying degrees and in a concentration-dependent (dose-dependent) manner. Anthocyanin supplementation may be an additional approach to reduce the severity of disorders in which free radicals and oxidative stress are important factors Key words: anthocyanin, in vitro, ß-thalassemia, redox status, GSH, MDA. ملخص على الرغم من انβ الثالسيميا الكبرى هي اعتالل هيموغلوبيني وراثي ناتج عن خلل في انتاج سلسلة β غلوبين اال ان االجهاد التاكسدي يلعب دورا كبيرا في الفيزيولوجيا المرضية له. هذا يثير إمكانية استخدام مضادات األكسدة لمنع التغيرات التأكسدية خالل هذا المرض. يبدو أن األنثوسيانين تلعب دو ًرا مهًما في الوقاية من العديد من األمراض البشرية بفضل خصائصها المضادة لألكسدة ضعف خطين من الخاليا البشرية )كريات الدم الحمراء العادية / التالسيمية ، والخاليا الليمفاوية( امام لإلجهاد التأكسدي الناجم عن ...... )......( وحمايتهم بسلسلتين من األنثوسيانين ) الطبيعية واالصطناعية( هي موضوع هذا البحث. تم اخذ كريات الدم الحمراء من اشخاص اصحاء و مصابين ب -β الثالسيميا والخاليا الليمفاوية من األشخاص اصحاء ومعالجتها بواسطة .. ...... في ظل ظروف موحدة. تم استخدام بروتوكولين لتقييم التأثير المباشر والتأثير الوقائي لألنثوسيانين مقابل األضرار الناتجة تجريبيا عن طريق ..... معدل قابلية الحياة الخلوي ، وتشكيل .ومستويات .. ... تم قياسها قبل وبعد العالج باألنتوسيانين. كما تم قياس النشاط المضاد للجذور الحرة ........ لألنثوسيانين تظهر نتائجنا أن غالبية األنثوسيانين التي تم اختبارها لها آثار مفيدة اعتماًدا على التركيز ونوع الخلية المستخدمة. في الواقع ، أظهرت الخاليا الليمفاوية وكذلك كريات الدم الحمراء )طبيعية / β الثالسيمية( حساسية كبيرة لـ ....... كما لوحظ أن هذه الحساسية تم تصحيحها بواسطة األنثوسيانين التي تم اختبارها بدرجات متفاوتة وبطريقة تعتمد على تركيز األنثوسيانين قد تشكل مكمالت األنثوسيانين نه ًجا إضافًيا لتقليل شدة االضطرابات المرضية التي تشكل فيها الجذور الحرة واإلجهاد التأكسدي عوامل مهمة كلمات مفتاحية MDA ،GSH ،حالة األكسدة ، ß : أنثوسيانين ،β الثالسيميا